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Pierce™ 經(jīng)典磁珠法 IP/Co-IP 試劑盒 分子生物試劑

  • 更新時(shí)間:  2023-07-27
  • 產(chǎn)品型號(hào):  88804
  • 簡單描述
  • Pierce™ 經(jīng)典磁珠法 IP/Co-IP 試劑盒
    Thermo Scientific Pierce 經(jīng)典磁珠法 IP/Co-IP 試劑盒使用不到 10 µg 的抗體和磁性分離器可高度有效且高效地對抗原和蛋白復(fù)合物進(jìn)行免疫沉淀 (IP) 和免疫共沉淀 (co-IP)。
詳細(xì)介紹

Pierce™ 經(jīng)典磁珠法 IP/Co-IP 試劑盒


Thermo Scientific Pierce 經(jīng)典磁珠法 IP/Co-IP 試劑盒使用不到 10 µg 的抗體和磁性分離器可高度有效且高效地對抗原和蛋白復(fù)合物進(jìn)行免疫沉淀 (IP) 和免疫共沉淀 (co-IP)。

經(jīng)典磁珠法 IP/Co-IP 試劑盒的特點(diǎn):

兼容—基于蛋白 A/G 重組蛋白的磁珠可確保與大多數(shù)一抗(無論來自小鼠還是兔)兼容
• 快速—免疫沉淀短至 30 分鐘,以降低背景并提高瞬時(shí)蛋白復(fù)合物的捕獲水平
• 潔凈—固定您的抗體,以防止洗脫液受到污染
• 耐受性—在存在去污劑、低 pH 值緩沖液或常見質(zhì)譜溶劑的情況下,不會(huì)浸出蛋白 A/G
• 高效—與其他磁珠相比,使用一半推薦體積的磁粒子進(jìn)行免疫沉淀
• 便利—綜合 Co-IP 試劑盒包含磁珠和完整免疫沉淀實(shí)驗(yàn)所需的所有必要緩沖液

本免疫沉淀試劑盒使用高質(zhì)量 Thermo Scientific Pierce 蛋白 A/G 磁珠以及優(yōu)化的緩沖液和靈活的實(shí)驗(yàn)方案以獲得高得率 IP 或 co-IP,其可使用手動(dòng)或自動(dòng)磁性分離工具。優(yōu)化的裂解/洗滌緩沖液優(yōu)化了抗體-抗原的得率和高效結(jié)合以及 co-IP 相互作用。相對溫和的低 pH 值洗脫緩沖液可使結(jié)合的免疫復(fù)合物與蛋白 A/G 分離?;蛘?,內(nèi)含的泳道標(biāo)志物樣品緩沖液提供了快速的變性洗脫,用于 IP 產(chǎn)物的直接 SDS-PAGE 分析。

包括:
Pierce 蛋白 A/G 磁珠、裂解/洗滌緩沖液、洗脫緩沖液、中和緩沖液及上樣緩沖液

使用磁粒子進(jìn)行免疫沉淀與微珠狀瓊脂糖 IP 非常相似,只是使用磁鐵而非通過離心進(jìn)行分離。首先將特異性抗體加入到樣品中,形成一種免疫復(fù)合物,然后與磁珠結(jié)合。洗滌復(fù)合物以去除未結(jié)合的材料,低 pH 值洗脫緩沖液可使結(jié)合的免疫復(fù)合物與蛋白 A/G 分離。或者,包括泳道標(biāo)志物樣品緩沖液,用于使用變性條件進(jìn)行解離或者用于 SDS-PAGE 分析的下游樣品制備。該試劑盒包含 Thermo Scientific Pierce 蛋白 A/G 磁珠(用于快速方便地對抗原進(jìn)行磁性分離)以及優(yōu)化的緩沖液(用于提高抗原得率)。使用磁力架手動(dòng)從溶液中取出磁珠或者使用 Thermo Scientific KingFisher Flex 儀器等儀器通過自動(dòng)化操作從溶液中取出磁珠。

通常已知更長時(shí)間的抗體-樣品孵育(2 小時(shí)到過夜)通常在 IP 測定中具有更高的得率。人們通常認(rèn)為這種更高的得率與增加的背景有關(guān)。我們的研究人員發(fā)現(xiàn)過夜抗體-樣品結(jié)合然后使用 Pierce 經(jīng)典磁珠法 IP/Co-IP 試劑盒進(jìn)行免疫沉淀,通常會(huì)提高得率,但不會(huì)增加背景。因此,我們建議研究人員盡可能在至少 1 個(gè)小時(shí)內(nèi)執(zhí)行該結(jié)合步驟。

方案總結(jié)
• 將細(xì)胞裂解物與 IP 抗體在室溫下孵育 1 至 2 小時(shí)或在 4oC 下過夜孵育。
• 使抗原-抗體復(fù)合物與蛋白 A/G 磁珠在室溫下結(jié)合 1 小時(shí)。
•使用 IP 裂解/洗滌緩沖液洗滌微珠兩次,并用純化水洗滌一次。
•洗脫抗原/抗體復(fù)合物。



Pierce™ 經(jīng)典磁珠法 IP/Co-IP 試劑盒


規(guī)格

檢測
親和純化
適用于(設(shè)備)
KingFisher™ Flex,磁力架
形式
試劑盒
產(chǎn)品線
Pierce™
數(shù)量
1 個(gè)試劑盒
適用于(應(yīng)用)
免疫沉淀(IP)
Target
無靶標(biāo)特異性
類型
IP/Co-IP 試劑盒
足夠用于
40 次反應(yīng)
產(chǎn)品規(guī)格
試劑盒

內(nèi)容與儲(chǔ)存

足夠用于:40 使用 25 µL 的微珠進(jìn)行 IP 反應(yīng)
• Pierce 蛋白 A/G 磁珠,1 mL
• Pierce IP 裂解/洗滌緩沖液,2 x 50 mL
• 泳道標(biāo)志物樣品緩沖液 (5X),5 mL
• 洗脫緩沖液,5 mL
• 中和緩沖液,0.5 mL

在 4°C 下儲(chǔ)存。




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